项目简介
在基因表达调控研究中,解析转录因子与染色质的相互作用至关重要。ATAC-seq可以识别开放染色质区域,但无法直接鉴定与之结合的蛋白质复合物。表观生物隆重推出ATAC-MS(染色质开放性质谱检测)服务,ATAC-MS突破ATAC-seq的局限,可直接鉴定结合在开放染色质上的转录蛋白质复合物[1]。
ATAC-MS通过生物素修饰接头的高活性Tn5转座酶插入开放染色质区域上DNA,用链霉亲和素偶联的磁珠与生物素反应,富集复合物之后收集蛋白即可进行质谱,可直接鉴定蛋白质,精确量化蛋白质丰度,揭示转录调控的动态变化和机制。ATAC-MS也可配合ATAC-seq,联合分析结合的转录调控复合物和开放染色质区域基因组信息。
技术原理
通过生物素修饰接头的高活性Tn5转座酶插入开放染色质区域上DNA,用链霉亲和素偶联的磁珠与生物素反应,富集DNA及DNA上结合的转录蛋白复合物,对复合物进行蛋白质酶解-肽段纯化后进行质谱分析(富集DNA也可用于构建DNA文库,并行ATAC-seq)[1]。
技术优势
1. 对低丰度的转录因子具有高灵敏度
2. 可直接鉴定开放染色质区域的转录蛋白复合物
3. 可与ATAC-seq、RNA-seq联合分析,同时获取开放染色质的基因组位置、DNA结合蛋白和转录复合位点的相互作用信息,全面解析DNA-转录蛋白机制
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